Extraktion av DNA från Celler i munhålan

Extraktion av DNA från Celler i munhålan (kindens insida)
Ref. http://www.accessexcellence.org/AE/AEPC/DNA/detection.html

Sätt på ett vattenbad 100^oC och ta fram ett isbad.

Märk ett engångs centrifugrör eller liknande
Häll i 10 ml fysiologisk koksaltlösning
Häll saltlösningen i munnen och skölj runt den.
Skrapa också med tänderna mot kindens insida för att lösgöra celler.
Spotta ut sköljvätskan i en papp eller plastmugg
Sätt på locket. Sätt ner röret i en centrifug (tänk på att jämviktamot annat rör) och centrifugera ner cellerna vid ca 1000g under 10 min.
Häll försiktigt av supernatanten och sätt cellpelleten på is.
Tillsätt 10%-ig Chelex på följande sätt
Obs! Slamma ordentligt upp Chelexen genom att pipettera upp och ner många gånger och överför
500 µl av uppslamningen till cellpelleten. Här gäller det att vara snabb så att Chelexen inte hinner sedimentera.
Slamma upp cellerna i Chelexen genom att pipettera upp och ner många gånger.
Kontrollera noga att inga cellklumpar finns kvar i lösningen
Pipettera 500 µl av uppslamningen till ett rent eppendorfrör
Sätt eppendorfröret på kokande vattenbad under 10 min.
Kyl röret på is under 1 min.
Centrifugera 30 sek så att Chelexen hamnar i botten av röret.
Pipettera försiktigt 200 µl av supernatanten till ett rent eppendorfrör, som placeras på is. Denna supernatant innehåller nu bland annat humant DNA, som omgående används till PCR-reaktion.